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磺胺类(SAs)药物在水产畜禽养殖中应用十分广泛,主要在动物疾病防治方面有显著的疗效,但与此同时,这类药物显著的毒副作用也引起了人们的广泛关注。例如:影响泌尿系统功能,引起结晶尿,血尿等反应及致癌性。因此国内外对动物性食品中磺胺类药物以及单一磺胺药物的残留限量都做出了相应的规定。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,具有快速、简便和灵敏度高等优点,操作时间需45min,能减少检测时间和操作误差。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃。切勿冷冻。
3、洗涤液【配液1】在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品或样本50µL/孔到对应的微孔中,再加入磺胺类多残留酶标物50µL/孔,再加入磺胺类多残留抗试剂50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃ 避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液【配液1】250µL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物液B液50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃避光环境中反应15min。
8、测定:加入终止液50µL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值(若无酶标仪,则不加终
止液用目测法可进行判定)。