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五氯酚概要
五氯酚(Pentachlorophenol),属于有机氯农药,可作为杀虫剂、抗菌剂、防腐剂使用。五氯酚易在动物体内富集,能够通过食物链进入人体,严重危害人体健康。本试剂盒是应用ELISA最新技术研发而成的检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,能减少操作误差和工作强度。
五氯酚ELISA检测试剂盒试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被五氯酚抗原,样本残留的五氯酚和微孔条上预包被的抗原竞争五氯酚的抗体(抗试剂),加入酶标二抗(酶标物),经TMB底物显色,样本吸光度值与其残留物五氯酚呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中五氯酚的含量。
五氯酚ELISA检测试剂盒贮藏条件及有效期
贮藏条件:保存试剂盒于 2~8℃。
有效期:该产品有效期为 12 个月。
五氯酚ELISA检测试剂盒样本前处理步骤
样本处理前须知
处理任何样本时,都必须注意:
(a)实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时需换吸头;
(b)实验之前须检查各种实验器具是否洁净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果;
(c)未处理的组织样本需冷冻环境保存;
(d)处理好的样本应立即用于检测。
鸡肉、猪肉、鸭肉、鱼肉、虾肉
----称取2.0±0.05g均质后的组织样本至50mL聚苯乙烯离心管中,加入2mL乙腈,2500r/min振荡5min,于4000r/min离心5min;
----取40μL上清液加入到960μL样本稀释液【配液1】充分振荡混匀1min;
----取100μL用于分析。稀释倍数:25倍
五氯酚ELISA检测试剂盒检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出,回温溶解后方可使用。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入锡箔袋,保存于2~8℃,切勿冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品/样本100μL到对应的微孔中,再加入五氯酚抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、加酶标物:加入酶标物100μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15min,取出重复洗板步骤6。
8、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境反应15min。
9、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。
结果判定
请利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析(欢迎来电索取)。