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喹诺酮类(QNs),又称为吡酮酸类或吡啶酮酸类,是一类重要的广谱抗生素药物,能够抑制细菌DNA螺旋酶,常被作为抗感染药物在水产畜禽养殖中使用。由于其存在耐药性和潜在致癌性,世界各国对其部分药物的限量值(MRL)作了明确规定。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、灵敏度高等优点,能减少工作强度。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)回温30min以上,注意每种液体试剂使用前均需轻轻摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃。切勿冷冻。
3、洗涤液(配液1)在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品或样本50μL到对应的微孔中,然后加入喹诺酮类酶标物50μL/孔,最后加入喹诺酮类抗试剂50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃
避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液(配液1)250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后若有气泡,可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃避光环境中反应15min。
8、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀。设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值(若无酶标仪,则不加终止液用
目测法可进行判定)。