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概要
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DeoxynivaLenoL)又称呕吐毒素 (Vomitoxin)属于霉菌的单端孢菌素族,由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实样本中,由于其具有强的细胞毒性及免疫抑制性质,对人类及动物的健康构成威胁。
本试剂盒是应用ELISA最新技术研发而成的毒素检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间需20min,能减少工作强度和操作误差。
实验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法,在酶标板微孔上预包被呕吐毒素抗原,样本中的呕吐毒素和微孔上预包被的抗 原竞争呕吐毒素抗体(抗试剂),同时呕吐毒素抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB 底物显色,样本吸光度值与其所含呕吐毒素含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的校准系数,即可得出样本中呕吐毒素的含量。
贮藏条件及有效期
贮藏条件:保存试剂盒于 2~8℃。
有效期:该产品有效期为 12 个月。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 1h 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切 勿冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、请注意反应温度不宜过高,控制温度在 20~25℃。
5、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置(建 议在一次实验过程中,若使用 8 道移液器则标准品和样本 的总量不宜超过 48 个,即不宜超过 6 个检测条;建议若 使用单道移液器则不宜超过 16 个,即不宜超过 2 个检测 条)。
6、加标准品/样本:加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 加酶标物 50μL /孔,再加入抗试剂 50μL /孔(加抗试剂时 请使用多道移液器),轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反应 15min。
7、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL /孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
8、显色:加入底物液 100μL /孔(加底物液时请使用多道移 液器),用盖板膜盖板后置 25℃避光环境反应 5min。
9、测定:加入终止液 50μL /孔(加终止液时请使用多道移液 器),轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用 双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定 每孔 OD 值。