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本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被呋喃它酮代谢物抗原,样本中残留的呋喃它酮代谢物和此抗原竞争呋喃它酮代谢物抗体(抗试剂),同时呋喃它酮代谢物抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本的吸光度值与其残留物呋喃它酮代谢物的含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中呋喃它酮代谢物的含量。
适用范围
可定性、定量检测生鲜奶、蜂蜜样本中的呋喃它酮代谢物的含量。
1、 将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25°C)平衡30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、 取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8°C。 切勿冷冻。
3、 洗涤液在使用前也需回温。
4、 编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、 加标准品/样本:加标准品/样本50μL到对应的微孔中,再加入呋喃它酮代谢物酶标物50μL/孔,然后再加入呋喃它酮代谢物抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。
6、 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、 显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应 15min。
8、 测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长450/630nm 检测,请在5min内读完数据), 测定每孔OD值。
结果判定
请利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析(欢迎来电索取)。