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有柄涂抹海绵（D/E）适用于致病菌环境采样（可能存在酚类消毒剂、季铵盐类消毒剂、含氯消毒剂、过氧乙酸消毒剂、过氧化氢消毒剂的环境）。不可用于临床诊断。

1、实验时应穿戴一次性手套进行操作，以免外源污染。

2、取出涂抹海绵包装袋，撕开铝箔袋（外包装），取出并标记采样袋。

3、撕开采样袋（有密封金属丝的一侧），取出涂抹海绵，取出过程中不可碰触到涂抹海绵手柄以外的部分或者采样袋内壁。

4、采样的涂抹面积为25×25cm2，将海绵与待测表面呈30-45°角，Z字型涂抹。对于不规则的物体表面，无法取得25×25cm2表面积时，应该尽量涂抹足够的区域，并保证每次检测都采用连续一致的方法。

5、将涂抹海绵放入采样袋中（手柄接触部分不可放入），轻轻折断手柄。

6、向采样袋中加入对应的增菌培养基，对齐金属丝后卷曲数次，将金属丝沿着袋口进行弯折，进行后续培养鉴定。