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本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,操作时间短于45min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被庆大霉素抗原,样本残留的庆大霉素和此抗原竞争庆大霉素抗体,加入酶标二抗后,经TMB底物显色,样本吸光值与其残留物庆大霉素呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中庆大霉素的含量。
适用范围
可定性、定量检测生鲜奶样本中庆大霉素的含量。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25°C)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出,回温溶解后方可使用。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入锡箔袋,保存于2~8°C。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品/样本100μL到对应的微孔中,再加入庆大霉素酶标物50μL/孔,再加入庆大霉素抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25°C避光环境反应15min。
8、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
结果判定
若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析(欢迎来电索取)。