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概要 

乳铁蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，中性粒细胞颗粒中具有杀菌活性的单体糖蛋白。 乳铁蛋白不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗 癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、 抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。 

本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代牛乳铁蛋白检测产品，操作时间需 45min，能减少操作误差和工作强度。 

实验原理 

牛乳铁蛋白ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA 方法，在酶标微孔上预包被牛乳铁蛋白抗体，预包被的牛乳铁蛋白抗体与酶标抗体 （酶标物）同时与样本中的牛乳铁蛋白结合，形成抗体—牛乳铁蛋白—酶标抗体复合物，经TMB底物显色，样本吸光值与 牛乳铁蛋白的含量呈正相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中牛乳铁蛋白的含量。 

适用范围 

牛乳铁蛋白ELISA检测试剂盒可定性、定量检测奶粉样本中牛乳铁蛋白的含量。

贮藏条件及有效期 

贮藏条件：保存试剂盒于 2～8℃。 

有效期：该产品有效期为 12 个月。

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平 衡 1 小时或 37℃温箱平衡 30min 以上，注意每种液体试剂 使用前均须完全溶解摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于 2～8℃。切勿 冷冻。 

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标 准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加牛乳铁蛋白酶标物 50μL/孔到对应的微 孔中，再加入标准品或样本 50μL/孔。轻轻振荡混匀，用 盖板膜盖板后置 37℃避光环境中反应 15min。 

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液 250μL/ 孔，充分洗涤 4~5 次，每次间隔 10s，用吸水纸拍干（拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

7、显色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置 37℃避光环境中反 应 10min。 

8、测定：加入终止液 50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪 于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，请在 5min 内读完数据），测定每孔 OD 值。