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概要
玉米赤霉醇(Zearanol,ZAL)是一种效果理想的皮埋增重 剂,为一种微生物代谢产物,系非固醇、非激素类化合物,商 品名字“畜大壮”。农业部畜牧兽医司在1997年就发出通知, 严禁“玉米赤霉醇(又名畜大壮、牛羊增肉剂)埋植剂”用于 畜牧业生产。“玉米赤霉醇”具有雌激素样的作用,大多数发 达国家均禁止使用。玉米赤霉醇及其代谢产物具有雌激素类物 质的生物活性,对促性腺激素结合受体、体外肝脏激素结合受 体均有抑制作用。雌激素类物质的残留会引起人体性激素机能 紊乱及影响第二性征的正常发育,在外部条件诱导下,可能致癌。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点, 操作时间需45分钟,能减少工作强度和操作误差。
实验原理
本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔上预包被玉米赤霉醇抗原,样本残留的玉米赤霉醇和微孔上预包被 的抗原竞争玉米赤霉醇抗体(抗试剂),同时玉米赤霉醇抗体 与酶标二抗(酶标物)相结合后,经 TMB 底物显色,样本吸光值与其残留物玉米赤霉醇呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中玉米赤霉醇的含量。
适用范围
可定性、定量检测成品纯牛奶、待装罐奶、生鲜奶样本中玉米赤霉醇的含量。
贮藏条件及有效期
贮藏条件:保存试剂盒于 2~8℃。
有效期:该产品有效期为 12 个月。
检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 加酶标物 50μL/孔,再加入抗试剂 50μL/孔,轻轻振荡混匀, 用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反应 30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL /孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反 应 15min。
8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪 于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值(若无酶标仪,则不加终 止液用目测法可进行判定)。
结果判定
若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析(欢迎来电索取)。